НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина - Структура Центра
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
+7 (499) 324-24-24 - c 8:30 до 17:15
English Russian

Лаборатория клинической цитологии

Заведующий отделением Мехеда Лариса Владимировна

Мехеда
Лариса Владимировна


Должность:
Заведующий лабораторией-врач клинической лабораторной диагностики, к.б.н.
Отделение:
Подробнее

 Для постановки цитоморфологического диагноза проводит анализ клеточного состава различных патологических процессов (опухолей, опухолеподобных и воспалительных заболеваний) любой локализации.

Цели и задачи цитологической лаборатории:

  • формулировка предоперационного диагноза - определение гистогенеза образования, степени дифференцировки, уточнение степени распространенности опухолевого процесса, изучение фоновых изменений,
  • контроль эффективности проводимой терапии,
  • анализ консультативного материала,
  • оценка прогностических факторов и предиктивных свойств злокачественных опухолей,
  • интраоперационная диагностика,
  • создание цитоархива и коллекционного материала,
  • проведение школ по «классической и современной цитологии», создание обучающей программы и литературы для цитологов.

labs1.jpg

Виды проводимых исследований:

1. Традиционное цитологическое исследование.

 Изучаемый материал:

  • пунктаты, полученные при тонкоигольной аспирационной биопсии (ТИАБ) опухолевидных образований,  лимфатических узлов;
  • исследование секретов, мазков с поверхности ран и язв, выделения из соска;
  • материал, полученный при эндоскопическом обследовании больных – отпечатки с биоптата, соскобы, аспираты, эндоскопические пунктаты;
  • мокрота, моча, асцитическая и суставная жидкости, плевральные экссудаты и транссудаты, содержимое кист, ликвор.
  • отпечатки с разреза опухоли и лимфатических узлов при проведении  интраоперационных исследований.

 В лаборатории проводят традиционные цитологические исследования с несколькими видами окраски.

 При гинекологической патологии часто применяют метод окраски по Папаниколау. Этот метод позволяет оценить степень созревания цитоплазмы: от сине-зеленого цвета в незрелых клетках до розового в клетках со зрелой цитоплазмой и оранжевого в клетках с ороговением. В лаборатории для традиционных цитопрепаратов используется окраска по Романовскому в модификации Лейшмана. При окрашивании мазков по этому способу четко прокрашивается структура хроматина ядер и бактериальная флора.

Бактериологические исследования:

  • helicobacter pylori;
  • гинекологический материал (бактериальный вагиноз, трихомонадный кольпит, грибковая флора, лептотрикс и т.д.;)
  • определение цитоморфологических признаков вирусной инфекции: ВПЧ, герпес и т.д.

Техническое оснащение лаборатории

 Автоматический мультистейнер Tissue-Tek Prisma - является многофункциональным прибором, предоставляя возможность окраски до 660 стекол в час. В  памяти прибора могут быть запрограммированы до 50 протоколов окраски, 100 названий красителей, одновременно система может производить 11 протоколов окрашивания.

 Для разделения неоднородных жидких систем -  биологических жидкостей (транссудатов, экссудатов, лаважей, смывов, мочи, ликвора).

 Центрифуга Cyto-Tek® является автономным устройством, позволяющим переносить клетки из суспензии на предметное стекло путем центрифугирования.  

 Tissue-Tek Film -  аппарат для автоматического заключения цитологических препаратов под покровную пленку Tissue-Tek® Film®.  

 Tissue-Tek Autowrite – аппарат для автоматической печати бар-кода на цитологических препаратах.

Жидкостная цитология

 Метод, основанный на стандартизации технологии приготовления тонкослойных или монослойных цитологических препаратов из жидкой клеточной суспензии, для чего используют специальные  консервирующие жидкости и центрифуги. Клетки в таких мазках располагаются практически в один слой.

В лаборатории применяют следующие жидкостные технологии:

 Cytospin-3 (Thermo Scientific Shandon, UK):

  • можно использовать небольшой объем жидкости, содержащей небольшое число клеток,
  • быстрое приготовление препарата (5 минут-12 мазков),
  • можно использовать любой метод окрашивания,
  • быстрый и удобный просмотр: препарат однослойный,
  • занимает небольшую площадь (d=5 мм).

 Цитологический процессор NOVAPREP® NPS – аппарат, сочетающий полную автоматизацию пробоподготовки с максимально щадящими технологиями обработки цитологического материала, специально разработанными для полного сохранения клеточных и субтканевых структур.

 В основе технологии, используемой в данном приборе, лежит метод пассивной фильтрации и двойной декантации. Такая методика обработки жидкостного цитологического образца позволяет добиться максимального качества монослоя и свести к нулю потери клеточного материала и от оператора аппарата NOVAPREP® NPS требуется только загрузка базовых штативов пробами пациентов и материалами для изготовления мазков.

BD PrepStain:

  • метод приготовления цитологических монослойных препаратов на  предметных стеклах BD с использованием аппарата BD PrepStain™ и  фиксирующего раствора BD CytoRich Red, позволяющего не только фиксировать клеточный  материал, но и лизировать эритроциты;
  • за 45 минут готовится 48  монослойных препаратов высокого качества, за 8-ми  часовой рабочий день-288;
  • d  мазка=13мм,  окраска   только по Папаниколау, производится автоматически;
  • можно программировать количество окрашенных и не окрашенных мазков;
  • препараты очищены от слизи и крови.

 Однако! Метод требует длительной предподготовки.

 Препараты  PrepStain BD: плевральный выпот  у пациентки с карциномой молочной железы:

  1.  Окраска по Папаниколау, Х200;

  2. Иммуноцитохимическая положительная реакция с СК7 в клетках рака молочной железы, Х400.

 Преимущества применения жидкостных технологий  в цитологической диагностике:

  • сохраняется архитектоника клеточных структур,
  • клетки лежат без наслаивания друг на друга – в монослое,
  • клетки сосредоточены локально, в определенном месте на стекле, что значительно экономит реактивы при проведении
  • иммуноцитохимического, FISH исследования и значительно облегчает просмотр мазков, экономя время цитопатолога.

Cell block технология

 Технология Cell-block необходима для создания архива и ретроспективного цитологического и иммуногистохимического анализа эксфолиативного материала выпотов из серозных полостей.
 Комплексное применение цитологических исследований и Сell block технологии позволит с высокой долей вероятности выявлять доклинические рецидивы опухолей, мониторировать излеченность  различных онкозаболеваний, определять индивидуальный подход к назначению химиопрепаратов и выявлять опухоли высокой степени злокачественности с более агрессивным биологическим и клиническим течением.

Иммуноцитохимическое исследование

 Позволяет расширить возможности морфологических методов и на дооперационном этапе уточнить гистогенез, диагностировать первично-множественные поражения, степень распространения и оценить некоторые показатели прогноза и чувствительность опухоли к химиогормонотерапии.

 Иммуногистостейнер BenchMark ULTRA- это полностью автоматизированная система для проведения иммуноцитохимических реакций и in situ гибридизации. Аппарат автоматически выполняет все этапы приготовления препаратов, включая депарафинизацию, демаскировку антигена и подкраску гематоксилином в одной системе.

 Данная технология не только позволяет избежать контаминации между растворами, но и сокращает время работы прибора, так как нет необходимости производить промывку системы переноса после каждого дозирования.

 Любое стекло может быть окрашено в срочном режиме с помощью любой методики (ИГХ, CISH, SISH) без остановки, перенастройки, ожидания окончания других реакций в приборе. Используя уникальные запатентованные технологии Ventana, иммуностейнер BenchMark ULTRA гарантирует стандартизацию и воспроизводимость качества исследований.

  • Принтер для печати штрих-кодов
  • Принтер для печати отчетов
  • Персональный компьютер

 С целью проведения различных иммуноцитохимиеских исследований в лаборатории используется 65 моноклональных антител (DAKO, CELL MARQUE). 

 Оценка рецепторного статуса гормонозависимых опухолей молочной железы, эндометрия, яичников: 

  • Эстроген;
  • Прогестерон;
  • Андрогены.

 Определение основных факторов прогноза злокачественных новообразований:

  • Онкопротеин Her2/neu,
  • Белок,
  • пролиферативной активности Ki,
  • Белок р53,
  • CD44v6 и т.д.

 Проведение дифференциальной диагностики карцином при невыявленном источнике метастаза:

  • СК7,
  • СК20,
  • СК5/6,
  • СК19,
  • Cdx2,
  • TTF1,
  • RCC,
  • AFP ,
  • Mammaglobin и т.д.

  Установление гистогенеза при недифференцирован-ных опухолях:

  • Пан-СК,
  • ЭМА,
  • виментин,
  • десмин,
  • РЭА,
  • белок S100
  • и т.д.

 Выявление и дифференциальная диагностика нейроэндокринных новообразований: 

  • хромогранин, синаптофизин,
  • тиреоглобулин,  кальцитонин и т.д.

 Фенотипирование лимфом:

  • CD-45,
  • CD-3,
  • CD-15,
  • CD-20,
  • CD-30 и т.д.
Дифференциальная диагностика меланомы, саркомы:

  • виментин,
  • десмин,
  • S-100,
  • НМВ-45,
  • MelanAи т.д.
 Определение диссеминации карцином в серозные полости:

BerEp4 и т.д.

 Лазерный диссектор фирмы Leica
 Лазерный диссектор, содержащий инвертированный микроскоп с трансляторами для перемещения объекта, видеокамеру для регистрации изображения объекта, источник лазерного излучения, дисплей для отображения изображения видеокамеры и значений параметров работы блоков лазерного диссектора. Лазерное излучение от источника имеет два выхода - на микрообъектив инвертированного микроскопа для лазерного воздействия на биологические объекты в режиме in vitro и на волоконный эндоскоп.

 Основное назначение аналога состоит в вырезании интересующего фрагмента исследуемого материала, например биологической ткани, и его катапультирование в приемное устройство с помощью лазера.

 Применение предложенного устройства в режиме in vitro повышает точность диссекции (разрезания) отдельных клеток и точности воздействия на отдельные структурные элементы клетки (субмикронные размеры области повреждения биологического объекта), повышает эффективность слияния клеток (селективная гибридизация), также позволяет осуществлять изоляцию интересующего объекта на срезе ткани, цитологическом мазке расположенном на препаратодержателе микроскопа и проводить инактивацию отдельных органелл клеток при сохранении жизнеспособности клетки в целом.

В нашей лаборатории лазерный диссектор используют для «вырезания» и изъятия исследуемых комплексов опухолевых клеток с поверхности мазка в микропробирку для последующего генетического анализа.



загрузка карты...

Контакты

Фактический адрес:
115478, г. Москва, Каширское шоссе, д. 23
Единая справочная служба
8 (499) 324-24-24
Справочная служба Детского института
8 (499) 323-56-22