Размер:
AAA
Цвет: CCC
Изображения Вкл.Выкл.
Обычная версия сайта
Размер шрифта AAA

Отчет о выполнении прикладных научных исследований по теме: "Разработка инновационных биосовместимых матриксов на основе полимерных ультраволокнистых материалов, перспективных для протезирования трахеи с использованием клеточных технологий" 2 этап

ОТЧЕТ

выполнении прикладных научных исследований (проекта) по лоту шифр 2014-14-576-0058 по теме:

«Разработка инновационных биосовместимых матриксов на основе полимерных ультраволокнистых материалов, перспективных для протезирования трахеи с использованием клеточных технологий» (шифр заявки «2014-14-576-0058-067»)

14.604.21.0023

(промежуточный)

Этап 2

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ПОСТАВЛЕННЫХ ПЕРЕД ПНИ ЗАДАЧ

Уникальный идентификатор прикладных научных исследований (проекта) RFMEFI60414X0023

Соглашение с Минобрнауки России о предоставлении субсидии

№14.604.21.0023 от 17.06.2014 в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 - 2020 годы»

Объектом исследования на данном этапе работ являлись крупноразмерные матриксы на основе полимерных ультраволокнистых материалов, перспективных для протезирования трахеи с использованием клеточных технологий. Целью работы при выполнении данного этапа ПНИ являлись экспериментальные исследования поставленных перед ПНИ задач посредством гетеротопной трансплантации разработанных экспериментальных образцов матрикса трахеи собакам.

В ходе работ 2 этапа ПНИ была проведена стерилизация  6 экспериментальных образцов матриксов трахеи для крупных экспериментальных животных с последующим контролем их стерильности.  Затем из костного мозга потенциальных реципиентов (4 собак породы бигль) генерировали культуры аутологичных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (МСК), которые характеризовали количественно, морфологически и фенотипически, насыщали ими матриксы трахеи (не менее 420000 клеток на образец). После культивирования матриксов с клетками in vitro факт колонизации МСК поверхности всех образцов матрикса трахеи, т.е. их цитокондуктивность, был подтвержден. Для изучения in vivo биологических свойств разработанных экспериментальных образцов полноразмерных матриксов, колонизированных аутологичными  МСК, их гетеротопно трансплантировали собакам. В процессе наблюдения за состоянием животных после хирургической операции вплоть до завершения эксперимента (30-35 суток после имплантации образцов), а также после извлечения образцов матрикса  был проведен ряд исследований широкого 

спектра параметров с целью определения биосовместимости разработанных образцов матрикса трахеи после интегральной оценки полученных данных. В результате проведенного анализа патолого-ассоциированных признаков констатировали отсутствие общетоксического воздействия экспериментальных образцов матрикса при гетеротопной трансплантации, а также развития реакции их отторжения как местного так и системного характера. Отсутствие признаков деструкции экспериментальных образцов в организме реципиентов было доказано с использованием ряда методических подходов: компьютерная томография (КТ) и рентгенография тела собаки в области имплантации, анализ механических свойств (прочности и упругости), а также макро- и микроморфологии извлеченных образцов. По результатам проведенных на данном этапе ПНИ исследований было установлено, что разработанные образцы матриксов трахеи на основе полимерных ультраволокнистых материалов удовлетворяли следующим требованиям п. 4.1.6 ТЗ: были стерильны; сохраняли целостность и просвет матриксов при трансплантации; перед имплантацией были насыщены аутологичными МСК – не менее 250000 кл./образец; не вызывали местных и системных реакций отторжения при трансплантации; обеспечивали колонизацию клетками реципиента после трансплантации (цитокондуктивность); не обладали общетоксическим эффектом.  Также на данном этапе после корректировки проекта лабораторного технологического регламента, разработанного в ходе 1 этапа ПНИ, был разработан финальный документ - Лабораторный технологический регламент получения матриксов трахеи на основе полимерных ультраволокнистых материалов. Кроме того, в соответствии с требованиями п. 4.3. ТЗ  были завершены работы по разработке требований по обеспечению безопасности для жизни и здоровья людей и охраны окружающей среды, которые были реализованы или запланированы к реализации при выполнении различных этапов ПНИ. Результаты, полученные в ходе выполнения работа на этапе 2, будут использованы в ходе выполнения 3 этапа  ПНИ.